紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理，用來測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見光或紫外光（200～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器?？梢詼y(cè)定核酸和蛋白的濃度，也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。

 

紫外可見分光光度計(jì)的用途介紹：

 

1、對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分析鑒定，紫外可見分光光度計(jì)在制藥行業(yè)有著很大的前景。根據(jù)國內(nèi)外的書籍記載，已經(jīng)把很多的藥品紫外線吸收波長和相對(duì)應(yīng)的詳細(xì)參數(shù)記錄起來，給藥品分析帶來了很大的方便。

 

2、對(duì)比分析，把需要測(cè)定的樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品放在同等環(huán)境下進(jìn)行測(cè)量。如果兩種樣品得到的檢測(cè)結(jié)果*一樣，就表明這兩種樣品是同種物質(zhì)。要是沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品的話，可以選擇跟已知的標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)比分析，這種辦法對(duì)儀器的要求相當(dāng)高，檢測(cè)環(huán)境要求*。

 

3、在化學(xué)學(xué)科上的應(yīng)用，其可以檢驗(yàn)化學(xué)物質(zhì)的純度，同時(shí)也可以推算物質(zhì)的原子結(jié)構(gòu)，還可以對(duì)物質(zhì)之間的氫鍵進(jìn)行測(cè)定。特別是在有機(jī)化學(xué)方向的運(yùn)用，前景更是廣闊，能夠?qū)Τ煞直容^復(fù)雜的有機(jī)化合物進(jìn)行成分鑒定。

 

紫外可見分光光度計(jì)的主要指標(biāo)介紹：

 

(1)波長范圍

波長范圍是指儀器上、下限波長之間的工作范圍，是與光源色器及檢測(cè)器的光譜響應(yīng)特性有關(guān)。有的儀器在波長范圍兩端缺乏足夠的能量，難以正常工作。

(2)波長準(zhǔn)確度

波長準(zhǔn)確度是指儀器測(cè)定時(shí)標(biāo)稱的波長值與儀器出射的光線實(shí)際波長值參考值或理論值）之間的符合程度，一般用多次波長測(cè)量值平均值與參考值之差（即波長誤差）來衡量。

(3)波長重復(fù)性

波長重復(fù)性是儀器在相同測(cè)試條件下、一個(gè)較短的時(shí)間內(nèi)，對(duì)同一吸收或發(fā)射譜線進(jìn)行連續(xù)多次波長測(cè)量，測(cè)量結(jié)果的一致性。也稱波長精密度，即多次波長測(cè)試數(shù)據(jù)的符合程度。波長重復(fù)性一般用多次波長測(cè)試數(shù)據(jù)的離散性，即取波長準(zhǔn)確度多次測(cè)試結(jié)果中最大值與最小值之差來衡量。

(4)光譜帶寬

光譜帶寬指從經(jīng)過單色器后從出射狹縫出來的單色光的譜線輪曲線中峰高一半高度處的譜帶寬度。光譜帶寬可以表征儀器的光譜分辨率。光學(xué)帶寬越小越好，儀器一般可通過調(diào)窄狹縫，使光譜帶寬變小，但是同時(shí)光源能量弱，可能影響儀器對(duì)信號(hào)的檢測(cè)，降低儀器的靈敏度。光源輝線或一些較尖銳的吸光譜都可用于光譜帶寬的檢查。

(5)雜散光

雜散光是指到達(dá)檢測(cè)器的任何被測(cè)波長以外的其它波長的光。一般用在某規(guī)定的波長下測(cè)定在理論上該波長下*不吸收的某種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比來衡量。如紫外區(qū)可用Nal溶液測(cè)定波長為220nm處的雜散光，在可見區(qū)可用各種有色玻璃截止濾光片。雜散光是光譜測(cè)量中誤差的主要來源。雜散光越小越好。

(6)分辨率

分辨率是指儀器對(duì)于緊密相鄰的峰可分辨的最小波長間隔，是衡量分光光度計(jì)性能的重要指標(biāo)之一。單色器輸出的單色光的光譜純度、強(qiáng)度以及檢測(cè)器的光譜靈敏度等是影響儀器分辨率）主要因素。新版的檢定規(guī)程已取消分辨率要求，一般可用最小光譜帶寬來衡量。

(7)光度準(zhǔn)確度與透射比誤差

光度準(zhǔn)確度是吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確程度，一般用透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)實(shí)測(cè)吸光度值與其標(biāo)準(zhǔn)值之差（吸光度誤差）衡量。因?yàn)槲舛日`差在整個(gè)量程范圍內(nèi)的示值是非線性的》，因此用吸光度表示光度準(zhǔn)確度時(shí)，必須定其吸光度范圍。光度準(zhǔn)確度也可用透射比表示，即透射比準(zhǔn)確度，一般用透射比誤差（實(shí)測(cè)透射比值與其標(biāo)準(zhǔn)值之差）來衡量。透射比誤差是一個(gè)反映儀器綜合性能的指標(biāo)，與波長準(zhǔn)確度、雜散光、儀器穩(wěn)定性等眾多因素有關(guān)。

(8)光度重復(fù)性與透射比重復(fù)性

光度重復(fù)性是在相同的儀器上、相同條件如儀器波長、光譜帶寬不變，在短時(shí)間對(duì)同一樣品進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定吸光度，所測(cè)得值的一致性。光度重復(fù)性是影響分析結(jié)果可靠性的最主要因素，是關(guān)鍵性技術(shù)指標(biāo)，一般用多次重復(fù)測(cè)量吸光度的最大值與最小值之差來衡量。如按同樣方式測(cè)定透射比，即為透射比重復(fù)性。

(9)噪聲

噪聲是信號(hào)隨時(shí)間而無規(guī)則的變化。噪聲測(cè)量的方法是在儀器預(yù)熱穩(wěn)定后，在一定波長和一定光譜帶寬下，分別掃描透射比100%或O透射比幾分鐘(一般取2min)，量取獲得圖譜中最大值至最小值之間的值作為絕D噪聲水平。如掃描較長時(shí)間，一般30min，可獲得漂移。但在實(shí)際測(cè)定中，常用信噪比來描述儀的性能，如在100%線掃描時(shí)，噪聲是1%，則信噪比為100：1。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。

(1O)基線平直性

基線平直性是吸收池中不放任何東西時(shí)掃描基線(100%T線或OA線），基線傾斜彎曲的程度，它是儀器的重要性能指標(biāo)之一。一般用掃描圖譜中起點(diǎn)吸光度與偏離起點(diǎn)吸光度（取最大偏離點(diǎn)）之差來衡量。